Frank Warren Knuckles, Jr. sündis aastal 1955 ning alustas oma DJ-karjääri varastel 70ndatel New Yorgis, mõned aastad enne diskomuusika lainet. Kümme aastat hiljem kolis ta Chicagosse, kus ta asus mängima diskohitte ja soulmuusikat, mida paaritas trummimasina rütmidega suurtes underground-klubides Music Box ja Warehouse ning hiljem tema enda klubis Power Plant, andes oma kustumatu panuse house-muusika ja klubikultuuri sünnile.

Viljaka ja originaalse produtsendi ja miksijana asutas Knuckles Def Mix Productionsi, mis tegi aastakümnete jooksul koostööd sellist popmuusika legendidega nagu Michael Jackson, Diana Ross, Chaka Khan, Inner City ja En Vogue.

1991. aastal sõlmis ta artistilepingu plaadifirmaga Virgin, mille alt ilmus tema sooloalbum "Beyond the Mix", millelt said tuntuks tema lood "The Whistle Song," "Rainfalls" ja "Workout".

Aastal 2004 nimetati Chicagos vana Warehouse'i tänav tema järgi ning Knuckles on pälvinud ka oma vägagi väljateenitud koha Dance Music Hall of Fame'is.